MTHFR基因多態(tài)性對(duì)不同劑量葉酸治療高同型半胱氨酸血癥的影響

　　方法選擇2014年1月至2015年1月于本院就診的缺血性腦卒中伴HHcy患者198例為研究對(duì)象，進(jìn)行MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè)。按照MTHFR基因型分為CC型、CT型、TT型，每組患者隨機(jī)給予低劑量（0.4mg/d）、中劑量（0.8mg/d）及高劑量（5mg/d）葉酸。4周后復(fù)查血同型半胱氨酸（Hcy）水平，比較各組患者Hcy水平變化情況。

　　結(jié)果MTHFR677CC型的HHcy患者，應(yīng)用0.4mg/d葉酸即可有效降低Hcy水平，與應(yīng)用0.8mg/d及5mg/d葉酸相比，Hcy水平下降程度無(wú)顯著差異。而MTHFR677CT/TT型的HHcy患者，至少應(yīng)用0.8mg/d葉酸才可明顯降低Hcy水平。MTHFR677CT/TT型的HHcy患者，應(yīng)用0.8mg/d和5mg/d葉酸降低Hcy水平比較差異無(wú)顯著性。

　　結(jié)論對(duì)于MTHFR677CC型的HHcy患者，低劑量（0.4mg/d）葉酸可有效降低Hcy水平。但對(duì)于MTHFR677CT/TT型的HHcy患者，則需要應(yīng)用至少中劑量（0.8mg/d）葉酸才能有效降低Hcy水平。大劑量（5mg/d）葉酸降低Hcy程度與中、低劑量相比并無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)。

　　關(guān)鍵詞：MTHFR基因多態(tài)性；高同型半胱氨酸血癥；葉酸

　　目前越來(lái)越多的研究表明，高同型半胱氨酸血癥（hyperhomocysteinemia，HHcy）與多種臨床疾病相關(guān)，尤其在腦血管疾病中，其作為獨(dú)立的危險(xiǎn)因素越來(lái)越受到重視。血漿同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）水平受多種因素的影響，如腎功能減退、B族維生素或葉酸缺乏、雌激素缺乏、肥胖癥、吸煙、酒精、咖啡及年齡、性別等。亞甲基四氫葉酸還原酶（methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR）是一種黃素蛋白，可使亞甲基四氫葉酸還原為甲基四氫葉酸，是Hcy代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶之一，主要參與Hcy的再甲基化過(guò)程。MTHFR基因突變是引起MTHFR缺乏或活性降低的主要機(jī)制。已有研究證實(shí)，MTHFR基因C677T突變是HHcy成因之一[1，2]。

　　葉酸作為B族維生素之一，參與了Hcy再甲基化途徑，從而降低Hcy水平。但近十年的研究表明，葉酸與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[3]，其中包括胃癌、食管癌及結(jié)直腸癌等。大劑量葉酸雖可降低Hcy水平，但可能同時(shí)增加腫瘤的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，故探討合適劑量的葉酸治療不同MTHFR基因型的HHcy具有重要意義。本研究對(duì)HHcy患者進(jìn)行MTHFR基因多態(tài)性分析，同時(shí)測(cè)定血漿Hcy水平，不同MTHFR基因型患者應(yīng)用不同劑量葉酸予以治療，了解MTHFR基因多態(tài)性對(duì)不同劑量葉酸治療HHcy效果的影響，探索治療不同MTHFR基因型HHcy患者的適合葉酸劑量。

　　1、資料與方法

　　1.1、一般資料

　　選擇2014年1月至2015年1月于本院就診的缺血性腦卒中患者198例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合全國(guó)第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②Hcy水平＞10μmol/L。排除肝腎功能不全、腫瘤、器官移植患者。本研究經(jīng)本院臨床研究倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。檢測(cè)入組患者M(jìn)THFR基因多態(tài)性，根據(jù)不同MTHFR基因型將入選患者分為677CC型（CC組，21例）、677CT型（CT組，115例）、677TT型（TT組，62例）。MTHFRC677T基因TT型頻率為31.31%，CT型頻率為58.08%，CC型頻率為10.61%；T等位基因頻率為60.35%，C等位基因頻率為39.65%?；颊呋€特征見(jiàn)表1。CC組患者Hcy水平低于CT組及TT組（P＝0.012）。三組中高血壓患者所占比例比較差異具有顯著性（P＝0.014），其中CC組高血壓患者比例較高，其余人口學(xué)特征三組間比較差異均無(wú)顯著性（P＞0.05）。

　　1.2、研究方法

　　每組患者隨機(jī)分為三組[CC組（7例、7例、7例）、CT組（38例、39例、38例）、TT組（21例、21例、20例）]，第一組服用葉酸片0.4mg/d，第二組服用葉酸片0.8mg/d，第三組服用葉酸片5mg/d；三組患者共同服用維生素B630mg/d，維生素B120.5mg/d。4周后再次檢測(cè)Hcy水平，先進(jìn)行治療前后比較，觀察不同劑量葉酸對(duì)Hcy水平的影響。再進(jìn)行組間比較，觀察不同劑量葉酸對(duì)不同MTHFR基因型的HHcy患者HCy水平的影響。

　　1.3、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)

　　所有患者均空腹8～10小時(shí)，晨起采集靜脈血，測(cè)定Hcy水平。采用全自動(dòng)生化分析儀（日本日立7020）的循環(huán)酶法技術(shù)。試劑由四川麥克公司提供，試劑均有原公司提供的校準(zhǔn)品，進(jìn)行有效的質(zhì)控。

　　1.4、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

　　采用SPSS10.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以x±s表示，組內(nèi)治療前后比較采用t檢驗(yàn)，三組間計(jì)量資料兩兩比較采用方差分析；三組間計(jì)數(shù)資料兩兩比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有顯著性。

　　2、結(jié)果

　　CC組患者口服三種劑量葉酸治療后Hcy水平均較治療前下降（P分別為0.015、0.049、0.021）（表2～4）。服用0.8mg/d葉酸的不同MTHFR基因型（677CC型、677CT型、677TT型）的三組患者治療后Hcy水平均較治療前降低（P分別為0.049、0.002、0.000）（表3）。

　　服用5mg/d葉酸的不同MTHFR基因型的三組患者治療后Hcy水平均較治療前降低（P分別為0.021、0.011、0.003）（表4）。

　　CC組患者服用三種劑量葉酸治療后Hcy水平比較差異無(wú)顯著性（P＝0.975），CT組及TT組患者服用三種劑量葉酸治療后Hcy水平有比較差異均具有顯著性（P分別為0.034、0.013）。不同MTHFR基因型患者應(yīng)用0.4mg/d葉酸治療后Hcy水平比較差異具有顯著性（P＝0.038），不同MTHFR基因型患者應(yīng)用0.8mg/d及5mg/d葉酸治療后Hcy水平比較差異均無(wú)顯著性（P分別為0.174、0.945）（表5）。

　　3、討論

　　近年來(lái)，很多研究證實(shí)HHcy是很多疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，尤其與腦血管疾病、阿爾茨海默病、冠心病等心腦血管疾病密切相關(guān)，且Hcy水平與疾病的病變程度呈正相關(guān)[5-7]。MTHFR基因多態(tài)性是造成HHcy的原因之一[8-13]。研究表明，除心腦血管疾病外，MTHFR基因多態(tài)性與腹主動(dòng)脈瘤、帕金森病、可逆性后部白質(zhì)腦病、結(jié)腸癌等疾病的發(fā)生具有潛在聯(lián)系[14-17]。B族維生素（維生素B6、維生素B12和葉酸）是Hcy代謝必需的輔助因子，由于飲食、環(huán)境、生活習(xí)慣、藥物等原因造成B族維生素相對(duì)或絕對(duì)不足，也是導(dǎo)致HHcy的重要原因。增加維生素B6、維生素B12和葉酸攝入，可以降低血漿Hcy水平。但也有研究認(rèn)為提高葉酸水平對(duì)已形成的腫瘤具有促進(jìn)作用[18]。HOPE2試驗(yàn)顯示，服用0.8mg/d葉酸可降低腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[19]。但各文獻(xiàn)對(duì)藥物使用劑量報(bào)道不一。研究指出，650μg/d葉酸服用2周即可使血Hcy水平降至正常范圍[20]。因此探討針對(duì)不同MTHFR基因型的HHcy治療，葉酸的劑量選擇具有研究意義。

　　本研究結(jié)果顯示，缺血性腦卒中患者M(jìn)THFR677CC型若伴有HHcy，其Hcy水平低于677CT/TT型。對(duì)于MTHFR677CC型的HHcy患者，應(yīng)用0.4mg/d葉酸即可有效降低Hcy水平，與應(yīng)用0.8mg/d及5mg/d葉酸相比下降程度無(wú)顯著性差異。而MTHFR677CT/TT型的HHcy患者，至少應(yīng)用0.8mg/d葉酸才可明顯降低Hcy水平。MTHFR677CT/TT型的HHcy患者，應(yīng)用0.8mg/d和5mg/d葉酸降低Hcy水平無(wú)明顯差異。

　　本研究提示，對(duì)于MTHFR677CC型的HHcy患者，低劑量（0.4mg/d）葉酸即可有效降低Hcy水平。但對(duì)于MTHFR677CT/TT型的HHcy患者，則需要至少應(yīng)用0.8mg/d葉酸才能有效降低Hcy水平。大劑量葉酸降低Hcy程度與中、低劑量葉酸相比并無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)，且大劑量葉酸可能促進(jìn)潛在腫瘤發(fā)生，故不推薦應(yīng)用大劑量葉酸治療HHcy。本研究為單中心隨機(jī)對(duì)照研究，不可避免地存在選擇偏倚及信息偏倚等，且納入患者例數(shù)較少。本研究入組患者中CC型高血壓患者比例較高，可能與樣本數(shù)量較少有關(guān)。在進(jìn)一步的研究中將擴(kuò)大樣本量，以期得到更有意義的臨床結(jié)果。