一小滴體液中含細胞的數(shù)量很少,往往不足以用于癌癥的檢測,如今,采用一種只需要少量DNA樣本就可對多個基因進行分析的新方法克服了這一難題。這種分子水平上的測試尤其對于檢測breastfluid的癌細胞非常有用。
對于少量的乳腺組織樣本進行預(yù)實驗的結(jié)果表明這種方法能對少至50個細胞的組織樣本進行癌癥檢測,這一新的檢測方法發(fā)表在7月這一期的CancerResearch上。“我們的目標是使用分子學的方法幫助解決癌癥診斷中樣品不足的難題,以及顯微鏡檢觀察不清晰的困難”,約翰霍普金斯大學Kimmel癌癥中心的腫瘤學BarbaraB.Rubenstein教授。
Sukumar博士說,“如果更多的研究證實這種檢測方法的可行性,那么它能對細胞病理學與乳房造影法(早期胸部腫瘤X射線透視法)這些常規(guī)的癌診斷方法提供一些分子線索,幫助確定有無癌的跡象。”
這一方法被稱為定量多重甲基化特異性PCR(quantitativemultiplexmethylation-specificPCR,QM-MSP),這種方法的特點是可以特異地尋找DNA序列中甲基化程度高的區(qū)域。甲基基團通過結(jié)合到開啟基因的開關(guān)位置,可以調(diào)控DNA信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯,這個過程稱為甲基化。甲基化異常會錯誤地關(guān)閉某些基因,從而最終導致原本正常細胞中某些關(guān)鍵蛋白的缺失,加上一系列遺傳事件的發(fā)生,最終引發(fā)癌癥產(chǎn)生。
“此前,同時精確定量多個基因的甲基化程度還是不可能的,必須要經(jīng)過重復(fù)多次實驗才能實現(xiàn)。更何況在沒有足夠的樣本的情況下就不能進行這種重復(fù)實驗”,論文的第一作者KimmelCancerCenter的副研究員Fackler博士說,“如今,我們將現(xiàn)有的兩種類型的MSP方法融合在一起,從而最大程度減少了所需樣本的量。”
QM-MSP能同時檢測4-5個乳腺癌基因中每一個基因的甲基化程度。將這些百分比累計在一起后與閥值比較,若超過閥值水平則表明可能存在癌細胞,反之,則說明樣本正常。
在實驗中Hopkins的科學家們首先對組織樣本中一組已知甲基化異常與乳腺癌相關(guān)的基因進行QM-MSP檢測,結(jié)果表明這種方法檢測出乳腺癌的準確率84%(19個乳腺癌樣本中能夠正確檢測出16個),對正常樣本對照檢查的準確率為89%(9個正常樣本中的8個沒有檢測到癌細胞跡象)。
接著研究小組對乳腺管液(breastductfluid)樣本進行QM-MSP檢查,這些體液樣本是從乳管灌洗(ductallavage)過程中得到的。7個乳腺癌風險高但是沒有發(fā)現(xiàn)癌癥的樣本中,有6個檢測不到甲基化異常,有一個只檢測到某一個基因存在較低水平的甲基化異常。用QM-MSP方法對4個乳腺癌病人進行檢測,能夠檢測出兩個樣本中的癌細胞,研究者說這表明這一檢測方法有一定的應(yīng)用前景,現(xiàn)在JohnsHopkins科學家正在對這種方法進行大量的研究評估。
Hopkins的研究小組認為QM-MSP技術(shù)能被運用于其它癌癥的甲基化分析,比如從口腔灌洗液中檢測頭頸癌細胞、從痰液中檢測肺癌等等樣品量通常較少的檢查中。
(實習編輯:伊玥)
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