微生物無(wú)處不在，無(wú)論是體內(nèi)還是體外。與某一特定部位相關(guān)的一系列微生物，可以稱為菌群（microbiota），其所包含的遺傳物質(zhì)稱為微生物組（microbiome）。胃腸道是人體內(nèi)聚集微生物最多的部位。所以不難理解，目前研究最多的人體微生物就是腸道菌群。一般而言，腸道中包括60多個(gè)屬類(lèi)的微生物，其總量甚至超過(guò)體細(xì)胞。研究認(rèn)為人類(lèi)腸道菌群可以影響人類(lèi)健康的方方面面，其中就包括大腦。

目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)腸道與大腦相互作用的幾種不同渠道，例如：合成代謝產(chǎn)物及神經(jīng)遞質(zhì)、迷走神經(jīng)激動(dòng)、免疫系統(tǒng)的激活。越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)人體微生物參與了多種心理過(guò)程以及神經(jīng)精神疾病。其中就包括情緒障礙、焦慮癥、神經(jīng)發(fā)育疾病比如孤獨(dú)癥和精神分裂癥，甚至是一些神經(jīng)退行性疾病比如阿爾茲海默癥和帕金森病。此外，大部分的精神活性類(lèi)藥物都可以影響人體菌群。

本文總結(jié)了目前人體菌群在大腦健康、年齡相關(guān)認(rèn)知損傷以及神經(jīng)精神疾病中的雙向作用。此外，還將介紹目前研究中常見(jiàn)的的微生物學(xué)以及生物信息學(xué)技術(shù)。本文旨在讓讀者對(duì)這個(gè)新興的研究領(lǐng)域有所了解。

隨著近幾十年測(cè)序技術(shù)以及生物信息學(xué)的發(fā)展，對(duì)于菌群生態(tài)系統(tǒng)復(fù)雜組成的研究得以開(kāi)展，對(duì)于該生態(tài)系統(tǒng)的代謝組學(xué)以及宏基因組學(xué)研究也越來(lái)越多。我們對(duì)于微生物的理解隨之改變。現(xiàn)在我們不只把其當(dāng)成致病因素，也更多的了解到其在促進(jìn)健康當(dāng)中的作用。腸道菌群包含細(xì)菌、真菌、古生菌等唱過(guò)60個(gè)種屬的微生物。最近研究估算人類(lèi)腸道菌群平均包括3.0*1013的細(xì)菌含量，比人體細(xì)胞還要多。在一個(gè)70kg的人類(lèi)體內(nèi)腸道菌群的重量可以達(dá)到驚人的0.2kg。在遺傳上，絕大多數(shù)人體中找到的遺傳物質(zhì)或者基因都來(lái)源于微生物。本領(lǐng)域中最讓人感到驚訝的進(jìn)展就是，微生物其實(shí)在我們各個(gè)器官系統(tǒng)的運(yùn)作中都有著重要的作用，甚至包括大腦的活動(dòng)。

本文將回顧我們目前已知的微生物與大腦功能之間的聯(lián)系。首先，我們將討論微生物在健康個(gè)體中的發(fā)生發(fā)展以及功能。之后，我們將總結(jié)目前研究微生物的主要方法。最后，我們將關(guān)注微生物在應(yīng)激與疾病中起到的作用。其中就包括精神疾病、年齡相關(guān)的認(rèn)知損傷以及神經(jīng)系統(tǒng)疾病。本文的目的推動(dòng)更多的關(guān)于微生物與大腦功能，尤其是關(guān)于精神健康與疾病的研究。人體微生物不僅有著巨大的潛在的精神疾病治療靶點(diǎn)，也是改善健康人群總體健康、心理狀態(tài)、認(rèn)知功能的可能的靶點(diǎn)。

“健康的”微生物

值得注意的是，我們生活在微生物的世界中。微生物首先出現(xiàn)在這個(gè)世界，我們的大腦子從來(lái)沒(méi)有體驗(yàn)過(guò)一個(gè)沒(méi)有微生物的世界。在此語(yǔ)境下討論人類(lèi)作為宿主的問(wèn)題是很有必要的。雖然科學(xué)還原論是一種重要的工具，但是更全面的系統(tǒng)生物學(xué)方法使得我們能夠更準(zhǔn)確且復(fù)雜的理解其中的相互作用。在上述觀念的引領(lǐng)下，一種指代宿主以及其微生物群的新的術(shù)語(yǔ)“共生功能體”，正越來(lái)越受到關(guān)注。通過(guò)模糊器官系統(tǒng)之前的界限，“共生功能體”這一概念為理解宿主與微生物之間多水平的相互作用提供了一個(gè)實(shí)際的概念。

微生物的起源

每個(gè)人的微生物的組成都是獨(dú)一無(wú)二的，甚至在一生之中不得不同階段，微生物的組成都有巨大差異。目前認(rèn)為人體腸道菌群的形成是從分娩開(kāi)始的，但也有一些爭(zhēng)議。例如在胎盤(pán)和胎糞中檢測(cè)到微生物的DNA?？梢源_信的是，新生兒在生產(chǎn)的時(shí)候經(jīng)過(guò)產(chǎn)道而暴露于母親的陰道菌群之中。而當(dāng)新生兒是剖腹產(chǎn)時(shí)，其接觸的是皮膚菌群而不是陰道菌群。由此，兩種不同生產(chǎn)方式生產(chǎn)的新生兒的菌群組成有著顯著的差異。其他因素，例如早熟、母乳喂養(yǎng)、飼養(yǎng)寵物、父母吸煙、生產(chǎn)年齡、體重以及人種都對(duì)人體微生物的發(fā)展產(chǎn)生影響。

吃什么產(chǎn)什么

當(dāng)嬰兒長(zhǎng)大之后，那些早期因素似乎變得不再重要。比方說(shuō)，到6周大的時(shí)候，因順產(chǎn)和剖腹產(chǎn)而產(chǎn)生的微生物差異就已經(jīng)難以察覺(jué)。然而，有一個(gè)因素從始至終顯著影響著微生物的組成。那就是宿主的飲食。比如說(shuō)，西方飲食有著高糖分、多動(dòng)物油、碳水化合物多的特點(diǎn)，而地中海飲食的食物種類(lèi)豐富、纖維含量高。兩種飲食下的人群有著顯著的菌群差異。雖然有研究基于微生物的組成分離出不同的哺乳動(dòng)物腸道菌群分類(lèi)，且稱之為“腸型”（enterotype），但仍有很多爭(zhēng)議且有待改良。對(duì)于人體微生物可以分為幾種典型的腸型目前尚有爭(zhēng)議，但有一點(diǎn)共識(shí)是從屬的層面分為富含普雷沃菌屬類(lèi)（Prevotella）和富含擬桿菌屬（bacteroides）。這一差異可能與飲食有關(guān)，特別是高纖維飲食與普雷沃菌屬類(lèi)（Prevotella）相關(guān)。這也提示普雷沃菌屬類(lèi)與分解植物纖維的水解酶的產(chǎn)生有關(guān)。而擬桿菌屬（bacteroides）與西方飲食習(xí)慣有關(guān)。

微生物-腦-腸軸

目前的研究認(rèn)為腸道菌群能直接與大腦相互影響。這一過(guò)程主要通過(guò)幾條通路：迷走神經(jīng)激動(dòng)、免疫系統(tǒng)反應(yīng)以及菌群產(chǎn)生的神經(jīng)遞質(zhì)（圖一）。盡管具體的作用機(jī)制仍不清楚，但微生物與大腦之間的相互作用是顯而易見(jiàn)的。

除了與大腦的功能相關(guān)，腸道菌群也被認(rèn)為與大腦的生理發(fā)育過(guò)程有關(guān)。例如，在無(wú)菌大鼠大腦中發(fā)現(xiàn)前額葉神經(jīng)元髓鞘形成增多。此外，無(wú)菌大鼠大腦的杏仁核和海馬的樹(shù)突形態(tài)與對(duì)照組大鼠有顯著差異。在最近的一項(xiàng)研究中，研究者將發(fā)育較快和發(fā)育較慢的嬰兒的菌群分別移植到無(wú)菌大鼠生產(chǎn)的幼鼠身上，其中移植了發(fā)育較快嬰兒菌群的幼鼠有著更快的神經(jīng)元分化速度。此外，移植了發(fā)育較慢嬰兒菌群的幼鼠表現(xiàn)出更多的神經(jīng)炎癥反應(yīng)。最后，由菌群產(chǎn)生的Pglyrp2分子能穿過(guò)血腦屏障且影響無(wú)菌大鼠模型的蛋白表達(dá)。

不僅僅改變腸道菌群可以影響大腦，也有研究表明大腦也會(huì)影響腸道菌群。最近的一系列研究表明某些藥物，特別是有神經(jīng)活性的藥物，可以改變腸道菌群。在此方面證據(jù)最多的是抗精神病藥物。此外，大多數(shù)的抗抑郁藥包括被廣泛使用的SSRI類(lèi)，也被報(bào)道可以影響腸道菌群。此類(lèi)藥物在體外表現(xiàn)出抑制微生物活性的作用。這些結(jié)果提示精神活性藥物可能影響的是整個(gè)腦腸軸。同時(shí)應(yīng)激和心理因素對(duì)于腦腸軸的影響也同樣是全方位的。然而，目前很難辨別這些影響是腦對(duì)腸道菌群的信息傳導(dǎo)通路改變引起的，還是藥物對(duì)菌群的直接影響。其他方法和模型比如腦刺激或腦外傷模型也越來(lái)越多的被應(yīng)用到腦腸軸的研究當(dāng)中。目前腦刺激的研究尚較少，目前只有一篇發(fā)表于2018年的會(huì)議發(fā)言提到經(jīng)顱磁刺激通過(guò)改變腸道菌群而起到緩解肥胖的作用。在一項(xiàng)腦卒中動(dòng)物模型的研究中，大鼠盲腸菌群的在腦卒中72h后表現(xiàn)出顯著差異。這一發(fā)現(xiàn)與漢族腦卒中人群中展現(xiàn)出來(lái)的腸道菌群組成變化一致。綜上所述，不斷有研究提示大腦對(duì)于腸道菌群的影響。而這一切我們目前還知之甚少。

常見(jiàn)的研究方法

近幾年來(lái)涌現(xiàn)了大量的技術(shù)方法以及動(dòng)物模型，用以研究腸道菌群以及其與宿主的關(guān)系。下文中我們將討論最常見(jiàn)的幾種技術(shù)方法。大多數(shù)研究都將大鼠或小鼠作為菌群的宿主。與人體相比，兩種動(dòng)物都有各自的相似性和獨(dú)特性，因此他們是目前最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。然而也有小到果蠅，大到靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物都用來(lái)研究人體微生物。隨著我們對(duì)于腦腸軸的了解愈來(lái)愈多，可以預(yù)見(jiàn)會(huì)有更多的臨床實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)。

菌群消除：無(wú)菌動(dòng)物與抗生素

科學(xué)研究與工程學(xué)中最常用的研究方法就是消除某一要素然后觀察可能的后果，從而研究其重要性。無(wú)菌動(dòng)物是目前最好也是最實(shí)際的消除所有體內(nèi)微生物的動(dòng)物模型。該方法可將微生物與多種關(guān)鍵大腦功能及行為聯(lián)系在一起。然而，盡管無(wú)菌動(dòng)物表現(xiàn)出及其異常的神經(jīng)發(fā)育結(jié)果，但明確微生物在其中的作用仍十分困難。此外，如此極端的動(dòng)物模型也鮮有臨床轉(zhuǎn)化的價(jià)值。

雖然第一眼看上去跟無(wú)菌動(dòng)物模型很想，但抗生素提供了另一種獨(dú)特的研究微生物的動(dòng)物模型?？股啬Ｐ退哂械奶攸c(diǎn)是可以在特定的時(shí)間窗清除微生物而不影響其本身的神經(jīng)發(fā)育過(guò)程。然而，抗生素可能對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康帶來(lái)副作用，有時(shí)我們很難區(qū)分抗生素副作用與微生物的作用。此外，許多抗生素可穿透血腦屏障，因此在解釋抗生素動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)需要謹(jǐn)慎。

“好利友”：益生元、益生菌、合生元以及益心菌

既然菌群的失調(diào)會(huì)對(duì)宿主的健康產(chǎn)生負(fù)面的影響，研究者在嘗試主動(dòng)調(diào)節(jié)菌群以改善健康狀況。引入那些有證據(jù)證明或者被認(rèn)為對(duì)人體有益的益生菌是研究宿主與微生物之間關(guān)系的一種自然而然產(chǎn)生的方法。但是，我們需要了解可能不單單是某一種微生物有益，而是某一系列微生物在微生態(tài)系統(tǒng)中的作用起到作用。盡管益生菌這個(gè)概念越來(lái)越得到大眾的關(guān)注，但需要指出的是許多商業(yè)化的被包裝成益生菌的微生物產(chǎn)品并沒(méi)有經(jīng)過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)的檢驗(yàn)，嚴(yán)格意義上未達(dá)到促進(jìn)健康的標(biāo)準(zhǔn)。

益生元從更寬泛的方式上改變菌群組成。其主要是通過(guò)提供特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以促進(jìn)有益菌群的生長(zhǎng)。益生元相較于益生菌來(lái)說(shuō)缺乏特異性，因?yàn)楹茈y控制那些微生物會(huì)利用益生元并且繁殖。越來(lái)越多的研究將益生元和益生菌結(jié)合起來(lái)，發(fā)展為合生元。最后，就是在最近又推出了益心菌的概念，即那些有利于心理健康的微生物干預(yù)，尤其是在精神疾病中研究的較多。總而言之，這些方法大多可以結(jié)合到食物或者飲品當(dāng)中，從而以非侵入性的方式干預(yù)菌群。上述研究提示了益生菌的潛能，但也有陰性結(jié)果提示即便是同一種益生菌，其產(chǎn)生的結(jié)果可能不盡相同。這提示我們，除了用哪一種益生菌意外還有其他因素在發(fā)揮作用。微生物種群的行為是依賴于其代謝過(guò)程、微生物環(huán)境以及宿主環(huán)境的共同作用。

糞便微生物移植（FMT）

將糞便菌群移植作為一種治療方法的概念在西方醫(yī)學(xué)中引起了軒然大波。這個(gè)過(guò)程包括將合適的供體的糞便菌群引入受體的胃腸道中，讓受體的腸道菌群組成更類(lèi)似于供體。供體本身需要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的篩選，至少在嚙齒類(lèi)動(dòng)物中人們觀察到肥胖以及抑郁是可以通過(guò)糞便移植傳遞的。既往研究表明艱難梭菌反復(fù)感染的患者在接受糞便移植后其癥狀可得以改善。這提示了一種非侵入性且便宜的治療難治性疾病的方法。此外，糞便移植的方法也在各種不同的疾?。ū热纾耗c易激惹綜合征、脂肪性肝炎、潰瘍性結(jié)腸炎甚至是孤獨(dú)癥）中得到研究，以及將患者的菌群移植到大鼠體內(nèi)。有趣的是，在將科魚(yú)群體中，將年輕供體的糞便微生物移植到老年受體后，受體的生存時(shí)間得到延長(zhǎng)。

橫斷面研究

目前最廣泛使用的方法就是對(duì)比正常人群和疾病人群微生物組成的橫斷面研究。得益于越來(lái)越多的研究被發(fā)表，目前出現(xiàn)了很多數(shù)據(jù)庫(kù)例如“HumanPanMicrobialCommunitiesDatabase”以及“NIHHumanMicrobiomeProject”。需要注意的是，當(dāng)試圖整合不同數(shù)據(jù)庫(kù)中的數(shù)據(jù)時(shí)會(huì)遇到很多問(wèn)題。主要是因?yàn)椴煌瑪?shù)據(jù)庫(kù)之間微生物物質(zhì)的處理和分析過(guò)程不盡相同，進(jìn)而使標(biāo)本之間難以比較。

微生物數(shù)據(jù)分析

得益于不斷革新的測(cè)序方法，生物信息學(xué)也相應(yīng)的快速發(fā)展以面對(duì)日益增長(zhǎng)的數(shù)據(jù)量。16sRNA基因測(cè)序和全基因鳥(niǎo)槍法測(cè)序都可以分析微生物的組成和功能（圖2）。需要說(shuō)明的是，因?yàn)檫@一領(lǐng)域非常活躍，目前很難建立一套標(biāo)準(zhǔn)的數(shù)據(jù)分析范式。因此，我們建議在報(bào)道微生物相關(guān)研究時(shí)提供詳細(xì)的分析方法，以確保實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。

菌群與精神疾病

菌群與應(yīng)激

應(yīng)激不僅與HPA軸的激活相關(guān)，且與菌群狀態(tài)明確相關(guān)。不少研究都提示應(yīng)激在不同物種當(dāng)中都能改變宿主的菌群組成，無(wú)論是大鼠、小鼠、豚鼠、豬以及靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。

另一方面，腸道菌群也影響應(yīng)激反應(yīng)。Sudo等人發(fā)表的一項(xiàng)影響深遠(yuǎn)的研究提示，無(wú)菌大鼠在面臨應(yīng)激事件時(shí)HPA軸的興奮程度更高。在引入益生菌后HPA軸的興奮程度回歸正常水平，而引入腸道病原體后HPA軸的興奮異常進(jìn)一步加重。此外，后續(xù)實(shí)驗(yàn)也在多種動(dòng)物模型中證實(shí)益生菌能改善應(yīng)激反應(yīng)。臨床實(shí)驗(yàn)也表現(xiàn)出類(lèi)似的結(jié)果，益生菌能提高對(duì)應(yīng)激的承受能力或者減少應(yīng)激所致軀體不適以及認(rèn)知損傷。最后，某些益生元也表現(xiàn)出能緩解應(yīng)激所致菌群紊亂、生理反應(yīng)以及行為問(wèn)題。

注意缺陷多動(dòng)障礙

既往的研究就提示，飲食習(xí)慣是ADHD的發(fā)病誘因之一。也有研究支持通過(guò)改善飲食而控制ADHD的癥狀。根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)，有研究者就提出飲食習(xí)慣與ADHD之間的關(guān)系是借由腸道菌群產(chǎn)生的。前瞻性研究提示，ADHD患者的腸道菌群組成與健康對(duì)照組有顯著差異。也有一項(xiàng)小型前瞻性隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)提示圍產(chǎn)期的益生菌干預(yù)能降低ADHD的患病風(fēng)險(xiǎn)。

孤獨(dú)癥譜系障礙

ASD與胃腸道疾病有著密切的關(guān)系，其與不同類(lèi)型的胃腸道疾病都有著高共病率，且ASD的嚴(yán)重程度也與胃腸道不適程度相關(guān)。既往有一些研究發(fā)現(xiàn)ASD患者的腸道菌群與健康人群有著顯著區(qū)別。但這些相關(guān)性研究并無(wú)法說(shuō)明因果關(guān)系，因此基于菌群的治療方法越來(lái)越受到關(guān)注。最近一項(xiàng)小型的前瞻性實(shí)驗(yàn)證明糞便移植對(duì)孤獨(dú)癥的療效結(jié)果為陽(yáng)性，而圍產(chǎn)期補(bǔ)充益生菌能降低ASD的患病風(fēng)險(xiǎn)。此外，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也提示在多種孤獨(dú)癥的動(dòng)物模型中微生物都有著重要的作用。

精神分裂癥

近年來(lái)，越來(lái)越多的研究開(kāi)始關(guān)注微生物與精神分裂癥的關(guān)系。與ASD類(lèi)似的，精神分裂患者胃腸道疾病發(fā)病率也顯著高于健康人群。這一發(fā)現(xiàn)也許與精神分裂癥的免疫發(fā)病機(jī)制相關(guān)。而腸道菌群與免疫系統(tǒng)的發(fā)育和功能息息相關(guān)，也進(jìn)一步推測(cè)菌群與精神分裂癥相關(guān)。一項(xiàng)早前研究提示首發(fā)精神分裂癥患者的腸道菌群組成中，乳桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量顯著低與健康對(duì)照組。更重要的是，菌群的組成與陰性癥狀的程度相關(guān)，與一年后的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，但與抗精神病藥物治療方案無(wú)關(guān)。此外，也有研究表明精神分裂癥患者口咽部的菌群組成與健康對(duì)照有顯著差異。盡管有人提出將益生菌治療作為精神分裂癥的增效治療，但目前只有一項(xiàng)有關(guān)的研究發(fā)表。該研究發(fā)現(xiàn)加用益生菌對(duì)精神分裂癥的陽(yáng)性和陰性癥狀緩解并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

雙相情感障礙

有研究者提出腸道菌群介導(dǎo)的免疫活性可能與雙相情感障礙的發(fā)作有關(guān)。這一假說(shuō)的可能來(lái)源于對(duì)于雙相情感障礙患者近期使用廣譜抗生素的可能性是健康人群的兩倍。也有研究發(fā)現(xiàn)雙相情感障礙患者的腸道菌群組成與健康人群有顯著差異。其中，在厚壁菌門(mén)中的兩個(gè)不同的屬的差異較為明顯，且與癥狀嚴(yán)重程度相關(guān)。此外，一項(xiàng)前期研究提出補(bǔ)充益生菌能減少躁狂發(fā)作后出院患者的在住院率。

總結(jié)

微生物與腦健康的相互溝通有多種方式。很多時(shí)候我們難以分辨其因果關(guān)系，是大腦還是胃腸道還是其他系統(tǒng)例如免疫系統(tǒng)的作用？因此，我們建議在研究的時(shí)候不要將大腦和微生物群看作兩個(gè)獨(dú)立的器官，而是看作一個(gè)更復(fù)雜的生物系統(tǒng)中的一部分。當(dāng)我們討論健康與疾病的時(shí)候不應(yīng)忽視微生物。上述討論的疾病都伴隨著菌群的組成甚至是穩(wěn)定性的改變。與其關(guān)注某一特定種群的作用，觀察其在微生物穩(wěn)態(tài)中起到的作用更有科學(xué)意義。近期，菌群的“共位群”（guilds）的概念，即在分類(lèi)學(xué)上不同而在代謝功能上相關(guān)的微生物，被研究者們所關(guān)注。進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了飲食在腦腸軸當(dāng)中的作用，尤其是膳食纖維在維持“共位群”中的作用。飲食干預(yù)日漸成為一種可靠而可控的通過(guò)菌群微生物改善精神健康的方法。

考慮到微生物與許多疾病相關(guān)，將來(lái)的研究可能更多的著重揭示背后具體的作用機(jī)制。全面的理解腦腸軸在健康與疾病當(dāng)中的作用，對(duì)于預(yù)測(cè)精神活性藥物療效以及規(guī)避其副反應(yīng)有著巨大的價(jià)值。新的生物信息學(xué)技術(shù)例如機(jī)器學(xué)習(xí)或建模是一個(gè)很有前景的方向。目前仍有許多的挑戰(zhàn)在等待我們，例如如何處理研究復(fù)雜菌群環(huán)境時(shí)出現(xiàn)的海量數(shù)據(jù)。