肝細(xì)胞癌（HCC）是最常見(jiàn)的原發(fā)性肝癌，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。原發(fā)性肝癌的致病因素主要有肝炎病毒（HBV、HCV）的慢性感染、黃曲霉毒素暴露、嗜酒等，其中由非酒精性脂肪性肝炎引起的肝癌呈明顯的上升趨勢(shì)。除了腫瘤的惡性特征外，肝癌由于起病隱匿，發(fā)現(xiàn)時(shí)患者往往已失去治療機(jī)會(huì)，也是導(dǎo)致肝癌患者生存率差的重要因素。因此，如何早期發(fā)現(xiàn)肝癌一直是醫(yī)學(xué)界所面臨的重要挑戰(zhàn)。

　　近年來(lái)，雖然基于影像學(xué)的肝癌診斷有了長(zhǎng)足發(fā)展，但因其費(fèi)用昂貴，基于血清學(xué)檢測(cè)的早期肝癌篩查研究并未停歇。一些潛在的新型腫瘤標(biāo)志物，如甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3）、異常凝血酶原（DCP，或PIVKA-Ⅱ）、高爾基體蛋白73（GP73）等相繼被應(yīng)用于肝癌的篩查與臨床輔助診斷。本文將對(duì)我國(guó)肝癌診斷和篩查的一些血清學(xué)新老指標(biāo)的應(yīng)用情況做一簡(jiǎn)要介紹。

　　1.AFP對(duì)乙型肝炎相關(guān)肝癌仍有一定的診斷和生存預(yù)測(cè)價(jià)值

　　自上世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)AFP在原發(fā)性肝癌患者中升高以來(lái)，AFP一直被作為原發(fā)性肝癌的血清學(xué)診斷指標(biāo)。但該指標(biāo)在早期肝癌篩查應(yīng)用中存在一定的缺陷，例如約30%～40%的確診肝癌患者AFP并未有明顯升高，而在一些非肝癌患者中卻有AFP升高。本實(shí)驗(yàn)室的回顧性研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性肝癌和慢性肝病患者的血清AFP水平常有重疊，肝硬化中約有10%患者的血清AFP輕度升高（20～200ng/ml），這種慢性肝病患者血清AFP升高的現(xiàn)象為其在高危人群中監(jiān)測(cè)和早期發(fā)現(xiàn)肝癌造成一定困難和干擾。由于AFP在肝癌的篩查和診斷中存在靈敏度和特異度低的問(wèn)題，近年來(lái)歐洲肝臟研究學(xué)會(huì)和美國(guó)肝病研究學(xué)會(huì)在其更新的診療指南中不再將AFP作為肝癌的篩查與診斷標(biāo)準(zhǔn)。

　　歐美國(guó)家的肝癌病因以HCV感染、酒精性和代謝性因素為主，而我國(guó)的HCC多與慢性HBV感染有關(guān)。HBx基因轉(zhuǎn)錄激活肝細(xì)胞AFP基因表達(dá)的前期研究結(jié)果提示，AFP的肝癌診斷價(jià)值可能會(huì)受致病因素的影響。據(jù)此，筆者按致病因素的不同將肝癌患者分為HBV、HCV感染相關(guān)肝癌和其他非感染因素的肝癌，系統(tǒng)評(píng)價(jià)了在HBV感染背景下AFP對(duì)HCC診斷及預(yù)后預(yù)測(cè)的價(jià)值。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，AFP在HBV感染相關(guān)肝癌中仍然具有較好的診斷價(jià)值，其ROC曲線下面積為0.866，靈敏度為74.94%，特異度為86.29%。此外還發(fā)現(xiàn)，在HBV感染相關(guān)肝癌患者，其術(shù)前AFP越高，術(shù)后生存率越低，呈現(xiàn)出術(shù)后1、3、5年的生存率隨術(shù)前AFP值升高而逐漸降低的趨勢(shì)。這一現(xiàn)象未能在其他病因的肝癌中觀察到，提示在用AFP作為肝癌的預(yù)后指標(biāo)時(shí)應(yīng)將HBV相關(guān)肝癌與非HBV感染肝癌區(qū)別對(duì)待。

　　2.異常凝血酶原

　　DCP是一種維生素K缺乏誘導(dǎo)蛋白，其γ-羧基谷氨酸結(jié)構(gòu)中1個(gè)或多個(gè)谷氨酸殘基不完全羧化為γ-羧基谷氨酸，導(dǎo)致其失去正常凝血功能。1984年Liebman等首次提出DCP水平在肝癌患者中升高。近年來(lái)，大量臨床研究表明DCP有較好的敏感度和特異度，因此DCP逐漸地作為肝癌篩查和診斷的指標(biāo)用于臨床診斷。Kim等的研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤直徑≥5cm的患者，血清DCP濃度顯著升高，且DCP濃度與腫瘤TNM分期呈正相關(guān)性。筆者也發(fā)現(xiàn)，在HBV感染相關(guān)HCC患者中，高濃度的DCP與腫瘤直徑呈現(xiàn)出明顯的相關(guān)性。Li等對(duì)49篇AFP及DCP診斷HCC的研究進(jìn)行Meta分析，結(jié)果同樣顯示DCP診斷HCC的敏感度和特異度均優(yōu)于AFP。由于AFP受多種因素調(diào)控，約1/3的HCC患者的血清AFP水平正常。而對(duì)于這些患者，DCP診斷肝癌的曲線下面積達(dá)到了0.834（95%CI：0.779～0.891），靈敏度為63.2%，特異度達(dá)90.7%，提示DCP對(duì)AFP陰性的HCC患者的早期篩查有一定的作用。以上研究均提示，AFP與DCP兩者間具有互補(bǔ)關(guān)系，其診斷肝癌的準(zhǔn)確性明顯優(yōu)于DCP或AFP單獨(dú)應(yīng)用。因此，二者聯(lián)用未來(lái)將是國(guó)內(nèi)外常用的診斷模式。盡管如此，DCP作為HCC的早期篩查指標(biāo)仍有其缺陷，如果患者維生素K缺乏、飲酒或者服用華法林等抗凝劑均可導(dǎo)致DCP的異常升高，在臨床應(yīng)用中，要充分考慮到這些因素，避免其對(duì)診斷結(jié)果造成干擾。

　　3.GP73不具有對(duì)肝癌的診斷價(jià)值，卻是肝硬化診斷的良好指標(biāo)

　　GP73是一個(gè)有402個(gè)氨基酸、相對(duì)分子量為73KD的跨膜糖蛋白，又稱(chēng)為Ⅱ型高爾基體膜蛋白（Golph2）和高爾基體膜蛋白Ⅰ（Golm1）。在正常肝組織中，GP73主要在膽管上皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而肝細(xì)胞表達(dá)很少甚至不表達(dá)。GP73由于在肝癌患者血清中異常升高，被推薦作為原發(fā)性肝癌的診斷指標(biāo)應(yīng)用于臨床。但在后期的臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，進(jìn)展期肝纖維化及肝硬化患者血清GP73亦明顯升高。例如，筆者的相關(guān)研究結(jié)果顯示，盡管HCC患者血清中GP73水平［（121.30±2.47）ng/ml］遠(yuǎn)高于無(wú)肝硬化的慢性肝病患者［（45.86±0.680）ng/ml］（P＜0.001），但與肝硬化患者［（139.25±2.20）ng/ml］相比，兩者間并無(wú)差別（P＝0.139）。提示血清GP73檢測(cè)難以鑒別肝硬化和肝癌，而肝硬化患者恰恰是肝癌的高風(fēng)險(xiǎn)人群，因此血清GP73就失去了對(duì)肝癌的診斷價(jià)值。與之一致，以肝硬化患者為對(duì)照，血清GP73用作HCC診斷的ROC曲線下面積僅為0.613（95%CI：0.595～0.630，P＜0.001），幾乎沒(méi)有診斷價(jià)值。為了進(jìn)一步說(shuō)明血清GP73水平與肝癌無(wú)相關(guān)性，筆者進(jìn)一步對(duì)術(shù)后半年內(nèi)無(wú)復(fù)發(fā)的肝癌患者肝癌切除前后的血清GP73水平變化進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)不同于血清AFP在術(shù)后的明顯下降，血清GP73水平在肝癌瘤塊切除前后基本保持不變，提示血清GP73水平與腫瘤是否存在沒(méi)有關(guān)系。進(jìn)一步的多因素Logistic回歸模型分析結(jié)果也證明了這一點(diǎn)，血清GP73水平與HCC患者腫瘤大小、分化程度、TNM分期及AFP等腫瘤生物學(xué)特征無(wú)關(guān)。與之形成鮮明對(duì)照的是，筆者發(fā)現(xiàn)這些肝癌患者的血清GP73的水平與患者的肝纖維化及肝硬化相關(guān)指標(biāo)，如肝纖維化四項(xiàng)、血清GGT、總膽汁酸、凝血酶原時(shí)間及前白蛋白等密切相關(guān)（P＜0.001）。

　　筆者實(shí)驗(yàn)室后續(xù)開(kāi)展的一系列研究發(fā)現(xiàn)，在不同病因所致的肝纖維化、肝硬化患者中，血清GP73水平隨進(jìn)展期肝纖維化及肝硬化的嚴(yán)重程度逐步升高，能夠?qū)⑦M(jìn)展期肝纖維化、早期肝硬化與慢性肝病區(qū)分開(kāi)來(lái)。進(jìn)一步分析其對(duì)肝硬化的診斷價(jià)值發(fā)現(xiàn)，血清GP73診斷代償期肝硬化的曲線下面積為0.909（95%CI：0.896～0.921）（P＜0．0001），靈敏度為79.97%，特異度為92.43%，與肝臟彈力指數(shù)（LSM）、APRI及FIB-4對(duì)代償期肝硬化的診斷價(jià)值相當(dāng)。值得注意的是，在LSM測(cè)量準(zhǔn)確性容易受到影響的肥胖（BMI≥28）、脂肪肝、肝組織炎癥活動(dòng)度≥2、ALT有1～2倍升高、TBiL及總膽汁酸升高的患者中，血清GP73對(duì)代償期肝硬化的診斷價(jià)值高于LSM。此外，血清GP73對(duì)于慢乙肝、慢丙肝、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝以及其他原因引起的代償性肝硬化的診斷曲線下面積均在0.900以上。以上結(jié)果顯示血清GP73對(duì)代償期肝硬化有較好的診斷價(jià)值。進(jìn)一步分析具有肝活組織檢查的臨床樣本，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清GP73可在一定程度上作為反映肝纖維化嚴(yán)重程度的有效血清學(xué)診斷指標(biāo)，其在不同病因慢性肝病所致肝纖維化、肝硬化的診斷、預(yù)后評(píng)估及慢性肝病動(dòng)態(tài)監(jiān)控等方面均有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。

　　總之，在現(xiàn)階段我國(guó)的原發(fā)性肝癌仍以慢性HBV感染為主要致病因素的情況下，AFP在肝癌的診斷和預(yù)后評(píng)估上仍有較好的應(yīng)用價(jià)值，DCP作為一個(gè)新的血清學(xué)指標(biāo)，其診斷價(jià)值與AFP相當(dāng)。AFP和DCP聯(lián)合檢測(cè)，可在一定程度上改善原發(fā)性肝癌實(shí)驗(yàn)室診斷的現(xiàn)狀。血清GP73由于其在肝硬化階段存在普遍的異常升高，不推薦應(yīng)用于原發(fā)性肝癌的實(shí)驗(yàn)室診斷。