目前全球AD患者已達(dá)3000多萬，而我國AD患病總?cè)藬?shù)已超過600萬。AD已成為全球需優(yōu)先解決的重大健康問題，但臨床上尚無針對該病的有效的治療措施。近期多項(xiàng)以β-淀粉樣蛋白（amyloid-βprotein，Aβ）為靶點(diǎn)的藥物三期臨床試驗(yàn)宣告失敗，其主要原因之一可能為干預(yù)時機(jī)過晚。因此，早期診斷、早期干預(yù)成為AD研究領(lǐng)域的重要方向，具有重要的科學(xué)及臨床意義。但目前尚缺乏敏感性和特異性高的早期診斷方法。生物標(biāo)志物是AD早期診斷、病程監(jiān)測、指導(dǎo)治療和療效判斷的重要依據(jù)[1，2]，因此尋找有效的生物標(biāo)志物已成為AD領(lǐng)域亟待解決的重要問題。

　　1、AD生物標(biāo)志物的研究現(xiàn)狀

　　AD生物標(biāo)志物的研究主要基于AD的自然歷程及病理機(jī)制。當(dāng)前國際上大規(guī)模AD生物標(biāo)志物研究主要包括阿爾茨海默病神經(jīng)影像學(xué)計劃（Alzheimer'sDiseaseNeuroimagingInitiative，ADNI）、澳大利亞老齡化影像學(xué)、生物標(biāo)志物及生活方式研究（theAustralianImaging，Biomarker&LifestyleFlagshipStudyofAgeing，AIBL）、顯性遺傳性阿爾茨海默病網(wǎng)絡(luò)研究（theDominantlyInheritedAlzheimerNet-work，DIAN）等。ADNI研究（http://adni.loni.usc.edu/）于2004年啟動，包括ADNI1、ADNIGO、ADNI2三個階段，共納入1600多名研究對象，并收集其影像學(xué)資料及生物樣本，用以研究AD的自然發(fā)展歷程。AIBL研究（https://aibl.csiro.au/）于2006年啟動，以探索AD的生物標(biāo)志物、認(rèn)知特征、健康狀態(tài)及生活方式相關(guān)的保護(hù)或危險因素為目的，目前納入1000多名研究對象。DIAN研究（http://www.dian-info.org/）通過對顯性遺傳性AD的研究為解碼散發(fā)性AD及其他類型的癡呆奠定基礎(chǔ)。上述研究均介紹了AD發(fā)生發(fā)展的自然歷程，證實(shí)了AD發(fā)生過程中生物標(biāo)志物的變化順序：Aβ、tau蛋白、神經(jīng)變性、認(rèn)知功能下降。因此，尋找AD生物標(biāo)志物應(yīng)從其發(fā)生機(jī)制及病理環(huán)節(jié)著手：即Aβ代謝異常（過度產(chǎn)生、清除障礙和沉積）及tau蛋白代謝異常（過度磷酸化、神經(jīng)原纖維纏結(jié)形成）、其他繼發(fā)病理事件（炎癥、氧化應(yīng)激、能量代謝障礙、血-腦脊液屏障損害）、神經(jīng)變性（突觸功能障礙、神經(jīng)元損傷/丟失、腦萎縮）等[3，4]。

　　當(dāng)前研究的生物標(biāo)志物的來源主要包括體液標(biāo)志物（腦脊液、血液、唾液、尿液）和影像標(biāo)志物（結(jié)構(gòu)影像、功能影像和分子影像）[5-7]。其中腦脊液Aβ42、腦脊液磷酸化tau（p-tau）蛋白、腦脊液總tau（t-tau）蛋白、磁共振海馬萎縮、正電子發(fā)射計算機(jī)斷層掃描（positronemissiontomography，PET）影像[包括PET-氟代脫氧葡萄糖（FDG）和PET-Aβ]已經(jīng)確認(rèn)其診斷價值并納入新的AD診斷標(biāo)準(zhǔn)開始應(yīng)用于臨床[8，9]。近期研究發(fā)現(xiàn)了PET-tau示蹤劑，因tau蛋白與認(rèn)知的相關(guān)性較強(qiáng)，使PET-tau成為AD生物標(biāo)志物研究的熱點(diǎn)之一。研究結(jié)果顯示，PET-tau可有效區(qū)分AD和正常對照，并可用于AD的分期。除此之外，當(dāng)前研究的AD生物標(biāo)志物還包括淀粉樣前體蛋白（amyloidprecursorprotein，APP）代謝標(biāo)志物[如腦脊液及血液β-分泌酶（beta-siteapp-cleavingenzyme1，BACE1）、可溶性淀粉樣前體蛋白（solubleamyloidprecursorprotein，sAPP）α及sAPPβ、Aβ寡聚體、Aβ亞型等]、神經(jīng)炎癥標(biāo)志物[如腦脊液及血液YKL-40蛋白、膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glialfibrillaryacidicprotein，GFAP）、單核細(xì)胞趨化因子（monocytechemoattractantprotein-1，MCP-1）等]、氧化應(yīng)激標(biāo)志物（如腦脊液及血液F2-isoprostanes等）、神經(jīng)變性標(biāo)志物[如腦脊液及血液視錐蛋白樣蛋白（visininlikeprotein1，VILIP-1）、心型脂肪酸結(jié)合蛋白（heartfattyacidbindingprotein，HFABP）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuronspecificenolase，NSE）、神經(jīng)絲輕鏈（neurofilamentlightchain，NFL）蛋白、突觸相關(guān)蛋白（synaptosomal-associatedprotein25，SNAP-25）、神經(jīng)顆粒素等]及其他標(biāo)志物（如血液蛋白質(zhì)組、脂類組、系統(tǒng)炎性因子、mRNA、miRNA、Aβ自身抗體等）。近期薈萃分析表明，腦脊液內(nèi)t-tau蛋白、p-tau蛋白、Aβ42、NFL蛋白為區(qū)分AD和健康對照的高效應(yīng)指標(biāo)，NSE、VILIP-1、HFABP、YKL-40為中等效應(yīng)指標(biāo)，其中僅有t-tau、p-tau、Aβ42可預(yù)測輕度認(rèn)知功能損害（mildcognitiveimpairment，MCI）向AD的轉(zhuǎn)化；而血液內(nèi)僅有t-tau可有效區(qū)分AD和健康對照，僅Aβ40可預(yù)測MCI向AD的轉(zhuǎn)化，但其診斷效力很弱[6]。影像學(xué)標(biāo)志物除上述幾種廣泛研究的標(biāo)志物外，還包括新興的神經(jīng)炎癥PET顯像[10]、連接組學(xué)[11]等，而多模態(tài)影像學(xué)綜合了多種不同影像標(biāo)志物的特點(diǎn)，或可提高AD早期的診斷能力[7]。

　　為便于對眾多生物標(biāo)志物及病理生理狀態(tài)進(jìn)行描述，Jack等[8]于2016年提出一套A/T/N分類描述體系，其中A代表Aβ相關(guān)標(biāo)志物（如腦脊液Aβ42和PET-Aβ），T代表tau蛋白相關(guān)標(biāo)志物（如腦脊液p-tau和PET-tau），N代表神經(jīng)變性標(biāo)志物（如PET-FDG、結(jié)構(gòu)MRI、腦脊液t-tau）。該體系適用于所有認(rèn)知功能老化的人群研究，且對生物標(biāo)志物之間狀態(tài)轉(zhuǎn)換的研究表明，Aβ是AD發(fā)生的必要非充分條件，而神經(jīng)變性是直接發(fā)展為癡呆的必要前驅(qū)狀態(tài)；無Aβ病理改變而直接發(fā)展為神經(jīng)變性者（A-N+）被稱為可疑非AD病理生理改變（suspectednon-Alzheimer'spathophysiology，SNAP）；且在70歲以上的老齡人群中，A+N+的癡呆轉(zhuǎn)化率顯著高于A-N+[9]。

　　2、AD生物標(biāo)志物研究存在的問題

　　當(dāng)前AD生物標(biāo)志物研究眾多，亦存在許多問題：①對AD早期診斷，尤其是臨床前期診斷的特異性不足，也不能準(zhǔn)確反映病程和疾病嚴(yán)重度。Aβ斑塊和tau蛋白的神經(jīng)原纖維纏結(jié)雖是AD的重要病理特征，但并非AD的特異性，Aβ斑塊亦可見于路易體癡呆、帕金森癡呆等[12]，而tau蛋白病理亦可見于克雅病、進(jìn)行性核上性麻痹、額顳葉癡呆等[13]。因此，單獨(dú)的Aβ和tau蛋白的生物標(biāo)志物的診斷特異性不足，且不能準(zhǔn)確地預(yù)測MCI向AD的轉(zhuǎn)化以及疾病的嚴(yán)重程度。②生物標(biāo)志物檢測結(jié)果變異性大，難以確定統(tǒng)一的臨界值。由于研究對象存在人群差異及個體差異、不同中心/實(shí)驗(yàn)室采用的檢測方法或試劑不統(tǒng)一、同一方法或試劑的不同批次間變異性大、實(shí)際操作過程中存在多種影響因素，使得不同的研究難以獲得統(tǒng)一的臨界值[14]。③生物標(biāo)志物檢測方法的靈敏度低。如當(dāng)前用于檢測腦脊液及血液Aβ和tau蛋白的酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）試劑盒靈敏度低，影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。④腰椎穿刺為有創(chuàng)性，MRI和PET價格昂貴，不適合人群篩查。血液生物標(biāo)志物因創(chuàng)傷小、易操作、價格低等優(yōu)勢成為適于人群篩查和早期診斷的最具前景的生物標(biāo)志物來源[15，16]。

　　血液生物標(biāo)志物雖是研究的重要方向，目前仍存在下列問題和挑戰(zhàn)：①因血-腦脊液屏障的存在、血液的稀釋作用、外周代謝作用（如肝、腎、酶等）導(dǎo)致血液內(nèi)標(biāo)志物，尤其是腦源性Aβ和tau蛋白濃度低，不易檢測；②血液內(nèi)存在多種血細(xì)胞、白蛋白等血液成分干擾，影響檢測；③血液標(biāo)志物檢測的分析前影響因素較多，包括研究對象個體差異、血液采集過程、血液處理過程及樣本存儲等多方面因素[17]。

　　3、未來展望

　　未來AD生物標(biāo)志物的研究需要解決下列問題：

　?。?）尋找可用于早期診斷和疾病分期的、具有良好特異性和敏感性的生物標(biāo)志物：①尋找Aβ和tau蛋白上游調(diào)控的早期生物標(biāo)志物；②從AD發(fā)病機(jī)制相關(guān)環(huán)節(jié)（如神經(jīng)變性、其他繼發(fā)病理事件等）尋找新的生物標(biāo)志物；③從血液中尋找適于早期診斷和人群篩查的生物標(biāo)志物，用以指導(dǎo)進(jìn)一步檢查。

　?。?）研發(fā)敏感性、特異性和穩(wěn)定性高、適宜推廣的體液生物標(biāo)志物檢測試劑和方法，如超敏ELISA試劑盒、質(zhì)譜分析、全自動電化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)及Roche血液生物標(biāo)志物檢測系統(tǒng)等[18，19]。

　　（3）實(shí)現(xiàn)生物標(biāo)志物檢測的標(biāo)準(zhǔn)化，通過分析前因素的標(biāo)準(zhǔn)化、統(tǒng)一檢測手段和方法、采用自動分析方法等，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的可比性，為確定可用于臨床診斷的臨界值奠定基礎(chǔ)[20]。

　　（4）單憑一種生物標(biāo)志物難以準(zhǔn)確診斷并預(yù)測癡呆的發(fā)生，建立基于多個生物標(biāo)志物的聯(lián)合診斷方案[21]，如不同病理環(huán)節(jié)的生物標(biāo)志物聯(lián)合（Aβ代謝異常、tau蛋白代謝異常、神經(jīng)變性、其他病理環(huán)節(jié)），以利于疾病分期、早期診斷和精準(zhǔn)治療。

　　（5）尋找生物標(biāo)志物需要開展前瞻性研究，目前國際上的ADNI研究存在納入的研究中心較多、異質(zhì)性較大等不足，而AIBL研究存在人群樣本量偏少的缺陷，DIAN研究以家族性AD為研究對象，不能準(zhǔn)確反映散發(fā)性AD的情況。因此，我們應(yīng)汲取上述研究的經(jīng)驗(yàn)，采用全國統(tǒng)一協(xié)作模式，統(tǒng)一檢測標(biāo)準(zhǔn)，開展基于我國社區(qū)人群的大規(guī)模前瞻性隊列研究。