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Cancer cell:新核酸藥物可治擴(kuò)散性乳腺癌

2018-05-21 來源:解碼醫(yī)學(xué)  標(biāo)簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護(hù)膚
摘要:長非編碼RNA(lncRNA)是一類包含大量成員的RNA家族。這一類RNA長度超過200bp,不具有翻譯成蛋白質(zhì)的能力,因此得名。

NfkB是一類十分重要的轉(zhuǎn)錄因子,它參與調(diào)節(jié)了細(xì)胞的炎癥反應(yīng),免疫應(yīng)答,細(xì)胞增殖、分化以及存活等許多方面。同時(shí),研究也發(fā)現(xiàn)在許多種的癌癥微環(huán)境中NF-kB的非正常表達(dá)能夠引起炎癥反應(yīng),從而促進(jìn)癌癥的擴(kuò)散與侵染,這說明NF-kB是聯(lián)系炎癥反應(yīng)與癌癥的關(guān)鍵分子。目前有許多NF-kB的負(fù)向調(diào)節(jié)因子都被認(rèn)為可能具有抑制腫瘤惡化的潛力。

長非編碼RNA(lncRNA)是一類包含大量成員的RNA家族。這一類RNA長度超過200bp,不具有翻譯成蛋白質(zhì)的能力,因此得名。雖然不具有傳統(tǒng)RNA的功能,但lncRNA被發(fā)現(xiàn)具有許多調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性的能力。而且許多研究證明有些lncRNA在腫瘤增殖,凋亡,擴(kuò)散以及穩(wěn)態(tài)維持方面具有重要的功能。最近,中山大學(xué)中山紀(jì)念醫(yī)院乳腺癌研究中心的songerwei在Cell子刊《cancercell》上發(fā)表了關(guān)于lncRNA調(diào)節(jié)NF-kB活性進(jìn)而控制乳腺癌擴(kuò)散的分子機(jī)制。

首先,作者利用乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231作為研究對象分析了在TNF-a或IL-1b刺激下轉(zhuǎn)錄組的變化。結(jié)果顯示,在炎性因子刺激下,有23種lncRNA發(fā)生了上調(diào),28種發(fā)生了下調(diào)。其中包括一種叫做NKILA的lncRNA。通過PCR的方式,作者鑒定出了NKILA是一個長度為2570nt的轉(zhuǎn)錄本。作者利用免疫原位雜交的手段發(fā)現(xiàn)NKILA主要定位于胞質(zhì)中。之后,作者通過加入NF-kB入核的抑制劑Sc-3060或JSH-23來阻斷NF-kB的活性,結(jié)果顯示NF-kB的失活抑制了NKILA的上調(diào)。作者通過結(jié)合突變與染色質(zhì)免疫共沉淀的手段證明了NF-kB可以作用于NKILA編碼區(qū)上游的順式調(diào)控區(qū)域。這一結(jié)果說明炎性刺激引起的NKILA上調(diào)依賴于NF-kB的活性。

之后,作者通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NKILA的表達(dá)量在低擴(kuò)散性的細(xì)胞系中藥遠(yuǎn)高于在高擴(kuò)散性的細(xì)胞系中。由于NF-kB能夠正向促進(jìn)腫瘤的擴(kuò)散,作者希望了解NKILA是否與NF-kB的活性存在反饋抑制的作用。作者通過人為抑制乳腺癌細(xì)胞中NKILA的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)能夠提高NF-kB的表達(dá)量以及入核的效率。以上實(shí)驗(yàn)說明NKILA是NF-KB的負(fù)向調(diào)節(jié)因子。

進(jìn)一步,作者通過體外的生化試驗(yàn)與熒光成像實(shí)驗(yàn)證明NKILA能夠抑制Ikb在靜息狀態(tài)與激活狀態(tài)下磷酸化與降解。而這一功能依賴于它與p65-p50-IkB的相互作用。之后,作者通過一系列突變與生化實(shí)驗(yàn)找到了NKILA與IKB復(fù)合體相互作用的關(guān)鍵位點(diǎn):兩個RNA發(fā)卡結(jié)構(gòu)。其中一個與NK-kB的DNA結(jié)合位點(diǎn)十分相近。

最后,作者通過體外與體內(nèi)的功能學(xué)檢測分別證明了NKILA對于促進(jìn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡以及抑制腫瘤擴(kuò)散的能力,并能夠顯著延長患癌小鼠的存活時(shí)間。

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