miR-519家族對(duì)人牙周膜細(xì)胞內(nèi)MMP-2表達(dá)的影響
摘要:研究指出,miR-519家族可負(fù)性調(diào)控人牙周膜細(xì)胞內(nèi)MMP-2基因的表達(dá)。該文發(fā)表在2014年第03期《現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志》上。
近日,第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院口腔科研究人員發(fā)表論文,旨在探討miR-519家族對(duì)人牙周膜細(xì)胞內(nèi)MMP-2表達(dá)的影響。研究指出,miR-519家族可負(fù)性調(diào)控人牙周膜細(xì)胞內(nèi)MMP-2基因的表達(dá)。該文發(fā)表在2014年第03期《現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志》上。
構(gòu)建MMP-2雙熒光素酶野生型和突變型表達(dá)載體,應(yīng)用TargetScan和miRanda等軟件預(yù)測(cè)作用于MMP-23'-UTR靶向miRNA,利用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)驗(yàn)證靶向MMP-23'-非翻譯區(qū)(3'-UTR)的miRNA。用qRT-PCR和Westernblot技術(shù)檢測(cè)miR-519家族對(duì)MMP-2表達(dá)的調(diào)控。
軟件預(yù)測(cè)在MMP-2的3'-UTR位置有一個(gè)與miR-519家族的結(jié)合位點(diǎn);mimics-miR-519實(shí)驗(yàn)組與轉(zhuǎn)染controlmiR組和突變型載體組相比,能明顯降低MMP-2載體的熒光素酶活性(P<0.05)。qRT-PCR結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組的miR-519較對(duì)照組表達(dá)顯著增高(P<0.01)。qRT-PCR、Westernblot結(jié)果表明miR-519抑制MMP-2mRNA和蛋白水平表達(dá)(P<0.05)。