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傷寒與副傷寒

傷寒與副傷寒 的檢查:

血清免疫球蛋白M(IgM) 傷寒膠乳凝集試驗 嗜酸性粒細胞計數(shù)(E) 單核細胞計數(shù)(M) 血液及骨髓細菌培養(yǎng) 傷寒、副傷寒血清凝集試驗(肥達氏試驗,肥達反應,Widal)

(一)常規(guī)檢查
血白細胞大多為3×109/L~4×109/L,伴中性粒細胞減少和嗜酸粒細胞消失,后者隨病情的好轉(zhuǎn)逐漸回升。極期嗜酸粒細胞>2%,絕對計數(shù)超過4×108/L者可基本除外傷寒。高熱時可有輕度蛋白尿。糞便隱血試驗陽性。
(二)細菌學檢查
①血培養(yǎng)是確診的論據(jù),病程早期即可陽性,第7~10病日陽性率可達90%,第三周降為30%~40%,第四周時常陰性;②骨髓培養(yǎng)陽性率較血培養(yǎng)高,尤適合于已用抗菌素藥物治療,血培養(yǎng)陰性者;③糞便培養(yǎng),從潛伏期起便可獲陽性,第3~4周可高達80%,病后6周陽性率迅速下降,3%患者排菌可超過一年;④尿培養(yǎng):病程后期陽性率可達25%,但應避免糞便污染;⑤玫瑰疹的刮取物或活檢切片也可獲陽性培養(yǎng)。
(三)免疫學檢查
1.肥達氏試驗傷寒血清凝集試驗 即肥達反應陽性者對傷寒,副傷寒有輔助診斷價值。檢查中所用的抗原有傷寒桿菌菌體(O)抗原,鞭毛(H)抗原,副傷寒甲,乙,丙鞭毛抗原共5種,目的在于用凝集法測定病人血清中各種抗體的凝集效價。病程第1周陽性反應不多,一般從第2周開始陽性率逐漸增高,至第4周可達90%,病愈后陽性反應可持續(xù)數(shù)月之久。有少數(shù)病人抗體很遲才升高,甚至整個病程抗體效價很低(14.4%)或陰性(7.8%~10%),故不能據(jù)此而排除本病。
Widal試驗已沿用近100年,60年代曾有人對其特異性提出異議,認為其結(jié)果存在著混亂模糊的情況,非傷寒發(fā)熱性疾病Widal"s試驗也呈陽性結(jié)果,如各種急性感染,腫瘤,結(jié)締組織病性疾病,慢性潰瘍性結(jié)腸炎,均可出現(xiàn)陽性結(jié)果。Perlnan等認為無菌的結(jié)腸細胞和腸桿菌可能有共同的抗原,結(jié)腸粘膜損害所產(chǎn)生的抗結(jié)腸抗體與沙門菌菌體抗原起交叉反應,因此對肥達氏反應結(jié)果的判定宜審慎,必須密切結(jié)合臨床資料,還應強調(diào)恢復期血清抗體效價的對比,有人提出應用流行菌株抗原與國際菌株相比,陽性率可提高,建議用當?shù)亓餍芯耆〈鷩H標準菌株,以提高流行區(qū)域傷寒診斷的陽性率。
2.其他免疫學檢查
(1)被動血凝試驗(PHA):用傷寒桿菌菌體抗原致敏紅細胞,使之與被檢血清反應,根據(jù)紅細胞凝集狀況判斷有無傷寒特異性抗體存在,國內(nèi)外報道陽性率90%~98.35%,假陽性率5%左右。鮑行豪等曾報道LSP-PHA對傷寒血培養(yǎng)患者的檢出率為89.66%,早期病人90.02%,臨床確診者為82.5%,且主要檢測的是特異IgM抗體,故可用于早期診斷。
(2)對流免疫電泳(CIE):本方法可用于血清中可溶性傷寒抗原或抗體的檢測,操作簡便,便于基層推廣,特異性較高;但敏感性較低,不同作者報道為24%~92%,主要受采集血清時間的影響,發(fā)病初期最易測出,故可用于傷寒的早期診斷。
(3)協(xié)同凝集試驗(COA):利用金葡菌的葡萄球菌A蛋白(SPA)可與抗體IgG的Fc段結(jié)合的原理,先用傷寒抗體致敏帶有SPA的金葡菌,然后與抗原發(fā)生反應,本試驗的陽性率在81%~92.5%,特異性為94%~98%,一般來說,其敏感性高于CIE,而特異性較CIE差。
(4)免疫熒光試驗(IFT):Doshi等用傷寒桿菌菌體Vi懸液作抗原進行間接免疫熒光抗體檢測,140例血培養(yǎng)陽性的傷寒患者134例(95.7%)陽性;394例對照者僅4例(1%)假陽性,目前有關本法的報道尚少,傷寒疫苗預防接種和其它沙門氏菌感染是否會影響本試驗特異性,尚需進一步研究。
(5)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):ELISA的基本原理是用酶促反應的放大作用來顯示初級免疫學反應,既可檢測抗原,又可檢測抗體,用ELISA法檢測傷寒患者Vi抗原,靈敏性達1ng/ml,高于CoA法9100ng/ml,并可檢測到1∶1024稀釋后尿液中的Vi抗原。國內(nèi)、外用ELISA檢測過臨床標本中的Vi抗原,V9抗原,LPS,H抗原等,敏感性在62.5%~93.1%,因檢測抗原的不同而異,多數(shù)在80%以上。杭州鮑行豪等應用ELISA同時檢測IgM和IgG抗體,LPS-IgM-ELISA的敏感性為91.38%,特異性為99.02%,LPS-IgG-ELISA分別為93.1%和98.02%,在傷寒的血清免疫學診斷方法中,ELISA方法簡便,快速,敏感,特異性高,是公認較好的一種診斷方法。
(四)分子生物學診斷方法
1.DNA探針(DNAProbe)DNA探針是用DNA制備的診斷試劑,用于檢測或鑒定特定的細菌,方法是用一段已標記的特定的DNA片段(探針)與標本中已變性的細菌DNA雜交,通過測定是否發(fā)生雜交反應來達到檢測目的,由于此探針是以細菌專有的特異性基因片斷制備,故特異性很高。用DNA探針對培養(yǎng)所得的傷寒桿菌進行檢測,敏感性需標本中達1000個細菌才能檢出。DNAProbe的特異性高而敏感性低,一般用于菌種鑒定及分離。
2.聚合酶鏈反應(PCR)PCR方法是80年代中后期發(fā)展起來的一種分子生物學方法,它能在數(shù)小時內(nèi)在體外將目標基因或DNA片段擴增到數(shù)百萬倍,檢出率較DNA探針高100~10000倍,國外JaeHS等用PCR方法擴增傷寒的鞭毛抗原編碼基因,敏感度能檢出10個傷寒菌,特異性為100%,PCR方法因其高度敏感,易出現(xiàn)產(chǎn)物污染,所以控制PCR方法的假陽性及假陰性,是提高準確度的關鍵。

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