布氏菌病別名:波浪熱
布氏菌病 的檢查:
淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù) α-巰基乙醇試驗(yàn) 被動(dòng)血凝測定 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 血液及骨髓細(xì)菌培養(yǎng) 抗人球蛋白試驗(yàn) 血常規(guī) 尿液細(xì)菌培養(yǎng)
1.外周血象 白細(xì)胞計(jì)數(shù)正?;蚱?。淋巴細(xì)胞相對(duì)或絕對(duì)增加。有時(shí)可出現(xiàn)少數(shù)異型淋巴細(xì)胞。血沉在急性期增速,慢性期則正?;蚱撸掷m(xù)增速提示有活動(dòng)性。
2.病原體分離 可從血液,骨髓,腦脊液,尿液,膿液等進(jìn)行分離。牛型布魯菌初分離時(shí)不易生長,需有適當(dāng)?shù)亩趸辑h(huán)境。因布魯菌生長較慢,故各種培養(yǎng)需經(jīng)孵育2~4周后仍無細(xì)菌生長,才能判為陰性。但有人報(bào)告,如采用BACTEC9240血培養(yǎng)系統(tǒng),則93%(90/97)可在5天內(nèi)或97.6%(41/42)可在2~6天內(nèi)檢出。最近的報(bào)告也證實(shí)了這一點(diǎn):血培養(yǎng)均可在7天內(nèi),骨髓培養(yǎng)均在4天內(nèi)獲得陽性結(jié)果。一般認(rèn)為血培養(yǎng)陽性率急性期高,慢性期低。骨髓培養(yǎng)的陽性率較血培養(yǎng)高。必要時(shí)可將標(biāo)本接種豚鼠以分離布魯菌。有人建議,先將標(biāo)本,特別是慢性布氏菌病的血液注入雞蛋的卵黃中,37℃培養(yǎng)5天后,再將卵黃液轉(zhuǎn)種到瓊脂斜面上,37℃ 2~3天后觀察,認(rèn)為可提高陽性率。
3.免疫學(xué)檢查
(1)血清凝集試驗(yàn):方法很多,常用者有試管法和平板法。前者較靈敏,操作也較簡單,特異性也較好,故一般實(shí)驗(yàn)室常用;后者操作更簡單,靈敏性也高,但可有假陽性,故適用于篩查。平板法也有很多種,其中以虎紅緩沖液玻片凝集試驗(yàn)(RBPT)效果最佳。凝集試驗(yàn)于病程第1周即可出現(xiàn),第2~3周常呈強(qiáng)陽性。試管法1∶100以上有意義。病程中效價(jià)有4倍以上升高者意義更大。但接種過霍亂菌苗、兔熱病菌苗,布魯菌菌苗或做過布魯菌素皮內(nèi)試驗(yàn)者均可使凝集效價(jià)增高,應(yīng)當(dāng)注意。另外凝集反應(yīng)可有前帶現(xiàn)象(低稀釋度時(shí)陰性,而高稀釋度時(shí)反陽性)故稀釋度至少應(yīng)在1∶100以上。發(fā)生前帶現(xiàn)象的原因,有人認(rèn)為是由于存在IgA抗體,有人認(rèn)為與:IgA,IgG,IgM的比例有關(guān),當(dāng)以IgA抗體為主時(shí)就可出現(xiàn)前帶現(xiàn)象。凝集反應(yīng)在急性期時(shí)陽性率很高,可達(dá)80%~90%,慢性期則較低,僅30%左右。
(2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA):1∶320為陽性。靈敏性比凝集實(shí)驗(yàn)還高,特異性也很好。且可分別測定IgM,IgG,IgA抗體。其中IgM抗體出現(xiàn)較早,約于感染后1個(gè)月達(dá)高峰,然后開始下降。IgG抗體產(chǎn)生較晚,至6個(gè)月達(dá)高峰,10個(gè)月后開始下降。IgA抗體的消長規(guī)律與IgG相似,且不易被巰基化合物破壞。分別測定不同抗體有助于復(fù)發(fā)的判斷,復(fù)發(fā)時(shí)IgG抗體重新升高,而IgM,IgA抗體常繼續(xù)下降。本法還可分別測定抗胞質(zhì)(CP)抗體及抗LSP抗體。前者特異性較好,但出現(xiàn)較晚,且早期抗菌治療可影響其出現(xiàn),后者出現(xiàn)較早,且不受抗菌藥物的影響,但特異性稍差,故如兩者同時(shí)檢測,效果最好。
(3)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):1∶16為陽性。急性期及慢性期的陽性率均較高,特異性也很強(qiáng),但陽性出現(xiàn)時(shí)間較晚,病程第3周才開始陽性,且操作較為復(fù)雜,故僅用于診斷困難者,特別是慢性患者。
(4)抗入球蛋白試驗(yàn):1∶160( )為陽性。用于測定不完全抗體。陽性出現(xiàn)較晚,消失也較慢。比凝集試驗(yàn)及補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)更靈敏,急性期及慢性期陽性率均較高,特異性也較強(qiáng)。但操作較復(fù)雜,故僅用于診斷困難的病例,特別是慢性患者。
(5)其他血清學(xué)試驗(yàn):被動(dòng)血凝試驗(yàn),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),間接免疫熒光試驗(yàn),免疫電泳以及斑點(diǎn)免疫法(應(yīng)用銀標(biāo)記的布菌特異性抗原)等均可應(yīng)用。有人應(yīng)用2-巰基乙醇試驗(yàn)來鑒別自然感染和菌苗免疫,但尚待研究。
(6)皮內(nèi)試驗(yàn)為遲發(fā)性超敏反應(yīng)。發(fā)病后2~3周開始出現(xiàn)陽性,痊愈后仍能持續(xù)數(shù)年至20年,故陽性時(shí)不能鑒別是現(xiàn)癥患者還是既往感染,一般僅用于流行病學(xué)調(diào)查。但陰性時(shí)則不支持本病的診斷。
4.分子生物學(xué)檢查 近年來有人應(yīng)用能擴(kuò)增編碼Mr為31×103布魯菌抗原的223bp基因片段的引物進(jìn)行PCR法以診斷布病。認(rèn)為特異性與靈敏性均很好。除Ochrobactrum spp外,其他在血清學(xué)和種系發(fā)生學(xué)(phylogenesis)與布魯菌有關(guān)的其他微生物均陰性。有人對(duì)31例布氏菌病患者及45例健康人進(jìn)行此種檢測,結(jié)果特異性100%,陽性率97%,而且發(fā)現(xiàn)血清的陽性率高于全血。最近又有人應(yīng)用套式(nest)PCR,認(rèn)為可檢測到30個(gè)細(xì)菌,且無交叉反應(yīng)。
組織病理可在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)如淋巴結(jié)、脾、肝產(chǎn)生上皮樣細(xì)胞肉芽腫。皮損的組織學(xué)變化常無特異性,血管周圍有強(qiáng)烈炎癥反應(yīng),血管內(nèi)皮明顯增生,肉芽腫形成。
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