近年來，藥審部門對于基因毒物質(zhì)的審查越來越嚴(yán)，要求越來越高！基因毒物質(zhì)有無檢出？潛在風(fēng)險多大？研究到什么程度？已經(jīng)直接關(guān)系到項目的生死。但，筆者認(rèn)為，基因毒問題的“高標(biāo)準(zhǔn)、嚴(yán)要求”，對于藥物開發(fā)來說，決不可因噎廢食！如今天要說的“磺酸鹽藥物”，其成鹽所需的“磺酸”，本身即為基因毒物質(zhì)潛在隱患，但并未影響其對藥物屬性改良后成功上市的巨大幫助，且直至今日，無論國內(nèi)國外，這種成鹽方式依舊在使用著。值得藥物研發(fā)的小伙伴對其進(jìn)行研究學(xué)習(xí)！

1磺酸酯類基因毒導(dǎo)火索~“甲磺酸奈非那韋”

甲磺酸奈非那韋，是一種HIV-1蛋白酶抑制劑，用于治療HIV-1感染；由Agouron開發(fā)，1997年獲美國FDA批準(zhǔn)，1998年獲得歐洲EMA批準(zhǔn)，1998年獲得日本PMDA批準(zhǔn)，由Agouron和ViiVHealthcare在美國市場共同銷售，商品名為Viracept?。

2007年6月6日，歐洲EMA發(fā)現(xiàn)部分批次的抗愛滋病藥物Viracept，即奈非那韋甲磺酸鹽中含有高劑量的基因毒性雜質(zhì)~甲磺酸乙酯，決定召回由羅氏制藥生產(chǎn)的Viracept。該藥中的甲磺酸乙酯，作為潛在的致癌物質(zhì)，在藥物劑量為2.5g/d的情況下，高達(dá)2.75mg的甲磺酸乙酯可能被患者攝入體內(nèi)，進(jìn)而影響到患者的身體健康。

2磺酸酯類~都有哪些具體品種？

甲磺酸、苯甲磺酸等磺酸鹽物質(zhì)與微量的低級醇在合成反應(yīng)中生成烷基磺酸酯，如甲磺酸甲酯（MMS）、甲磺酸乙酯（EMS）、異丙基甲磺酸酯（IMS）、正丁基甲磺酸酯（NBMS），以及芳基磺酸酯如苯磺酸甲酯（MBS）、苯磺酸乙酯（EBS）、對甲苯磺酸酯（MP-TS），這些物質(zhì)可與DNA發(fā)生烷基化反應(yīng)，從而可能成為引發(fā)癌癥的誘因，因此控制藥物中該類雜質(zhì)的毒理學(xué)關(guān)注閾值（TTC）水平非常重要，歐洲EMA發(fā)布了關(guān)于基因毒性雜質(zhì)的最大攝取量為1.5μg/d。

3相關(guān)的重要指標(biāo)~TTC

歐洲EMA和美國FDA均提出采用“毒理學(xué)關(guān)注閾值”(thresh-oldoftoxicologicalconcern，TTC)作為基因毒性雜質(zhì)的可接受限度。在臨床開發(fā)階段，采用階段化TTC作為短期服藥時間內(nèi)基因毒性雜質(zhì)的限度，如下表所示?；蚨拘噪s質(zhì)的最大限度是TTC與藥物最大日服用劑量的比值，同時基因毒性雜質(zhì)大多化學(xué)性質(zhì)活潑、穩(wěn)定性差，這對分析方法提出了很高的要求。

4控制~具體分析方法

當(dāng)樣品的溶解性、穩(wěn)定性較好，響應(yīng)較強時，可以直接進(jìn)樣，然后采用氣相色譜法（GC）、液相色譜法（LC）及其聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析。

當(dāng)樣品不能滿足直接進(jìn)樣分析的條件時，需要對樣品進(jìn)行必要的前處理，通常的樣品前處理方法主要有各種萃取技術(shù)、衍生化方法等，對樣品進(jìn)行分離、純化、富集和濃縮，以達(dá)到分析方法的要求。

GC法主要用于測定揮發(fā)性的成分，該法靈敏度高，專屬性強。如甲磺酸酯類化合物的微量檢測可采用GC法及其聯(lián)用技術(shù)。GC法按進(jìn)樣方式的不同可分為直接進(jìn)樣GC法和頂空進(jìn)樣GC法，檢測器類型包括FID、ECD、NPD、MS等。

LC法與GC法相比，前者可以分析不揮發(fā)性成分，而且載樣量也較大，方法簡單、可行。方法主要有：高效液相色譜（HPLC）法；HPLC-MS法；萃取技術(shù)和衍生化法與HPLC-MS聯(lián)用；離子對色譜（IPC）法。

5生產(chǎn)過程如何避免？

基因毒性雜質(zhì)主要來源于原料藥合成過程中的起始物料、中間體、試劑和反應(yīng)副產(chǎn)物。此外，藥物在合成、儲存或者制劑過程中也可能會降解產(chǎn)生基因毒性雜質(zhì)。酸酯類化合物作為潛在基因毒性雜質(zhì)，應(yīng)該盡量避免生成。有研究報道磺酸酯的形成及影響其降解的各種因素，包括溫度、醇類、水分、酸、堿、鹽等，結(jié)果表明，在中性或微量堿過量（如2,6-二甲基吡啶）、無水、低濃度醇、弱于甲磺酸的酸類物質(zhì)（如磷酸）、鹽（如高氯酸鈉）的條件下可避免這些雜質(zhì)生成。目前沒有報道說明磺酸酯類化合物在其他藥物中降解產(chǎn)生。

6全球~“磺酸鹽藥物”

通過藥渡數(shù)據(jù)查詢，磺酸鹽藥物，已上市品種72個，NDA品種3個，臨床III期14個，臨床II期17個，臨床I期12個；治療領(lǐng)域方面，主要分布于腫瘤、心腦血管、神經(jīng)系統(tǒng)、感染、呼吸系統(tǒng)、內(nèi)分泌，等；部分藥物，詳情見下表（讀者可有所針對進(jìn)行查詢）。

7國內(nèi)~磺酸鹽藥物

進(jìn)一步查詢，國內(nèi)開發(fā)/在研藥物，“磺酸鹽藥物”，批準(zhǔn)上市品種1個，NDA品種2個，臨床III期品種5個，臨床II期品種4個，臨床I期品種11個；部分藥物，詳情見下表。