積液溶菌酶概述
溶菌酶為正常機(jī)體免疫防御機(jī)制的組成部分,具有溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的作用。在人體內(nèi),它存在于中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞內(nèi);也存在于黏膜分泌液中,成為體表防御因素之一。正常人尿中無溶菌酶。某些疾病患者血清或體液內(nèi)的溶菌酶活性值有顯著差別,故測定溶菌酶活性日益受到臨床重視。
積液溶菌酶正常值
血清:5-30mg/L(瓊脂平板法);9.6-14mg/L(比濁測定法)。
腦脊液:0mg/L(瓊脂平板法)。唾液:30-70mg/L(比濁測定法)。
尿液:0mg/L(瓊脂平板法);1-3mg/L(比濁測定法)。
積液溶菌酶臨床意義
異常結(jié)果:
血清溶菌酶測定對鑒別各型急性白血病有一定意義,急粒與急單血清溶菌酶升高;而急淋、急性紅白血病降低或正常;經(jīng)化療奏效病情緩解后,溶菌酶水平可恢復(fù)。血清溶菌酶測定可作為判斷局限性腸炎活動性的一個有用的指標(biāo),并且有助于判斷臨床過程的嚴(yán)重程度和對治療的反應(yīng)。
尿液溶菌酶含量增高的原因有:
(1)、腎小管損害;
(2)、高溶菌酶血癥;
(3)、腎組織破壞。臨床上測定尿液溶菌酶主要是作為腎小管損害的一個指標(biāo),各種原因的腎小管損害都可引起尿溶菌酶含量增高。腎移植患者定期檢查尿溶菌酶活性十分必要。如移植腎接受良好,則溶菌酶活性在7天內(nèi)恢復(fù)正常;若尿中過多的溶菌酶持續(xù)存在,必須疑及排斥反應(yīng)的發(fā)生。
細(xì)菌性腦膜炎患者腦脊液(CSF)溶菌酶含量遠(yuǎn)較病毒性腦膜炎患者的含量高。因此,用溶菌酶測定對二者的鑒別有重要意義。此外。CSF溶菌酶測定對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的原發(fā)性或繼發(fā)性腫瘤有一定輔助診斷價值?! ÷灾夤苎谆颊咛狄褐腥芫负拷档?重癥肺結(jié)核、泌尿系統(tǒng)感染患者血清或尿液中溶菌酶活性均可顯著升高。此外,溶菌酶含量測定亦可作為判斷局限性腸炎活動性指標(biāo)。并有助于對臨床過程的嚴(yán)重程度和治療反應(yīng)進(jìn)行評價。
需要檢測的人群:白血病患者、腎損壞者、腦膜炎者等 。
積液溶菌酶檢查方法
常用的方法有瓊脂平板法、比濁法。
1.溶壁微球菌平板的制備 溶壁微球菌在使用前于瓊脂斜面培養(yǎng)基上傳代一次,然后再接用于普通瓊脂平板37℃培養(yǎng)24h。用無菌蒸餾水洗下菌苔,2000r/min離心30min,棄上清。再加蒸餾水輕輕混勻,2000r/min離心30min,棄上清,稱沉淀物濕重,用無菌蒸餾水配成100g/L的濃菌液(菌液應(yīng)在臨用前配制,不宜存放過久),加熱殺死,備用。
2.稱瓊脂粉1g,加入的1/15mol/L pH6.4PBS 100ml,即成1%瓊脂。
3.取溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)品,用1/15mol/L pH6.4PBS制成5、25、100mg/L稀釋液。
4.取己配制好的菌液1ml,加到50~60℃己溶化的1%瓊脂中,搖勻,傾注平板(直徑7~9cm平板加1%瓊脂15ml),待冷凝。
5.用打孔器在溶壁微球菌瓊脂平板上打孔,孔間距18~20mm,用牙簽挑去孔內(nèi)瓊脂。
6.用毛細(xì)吸管取唾液(新鮮收集,盛于潔凈平皿內(nèi),取上層清液)或血清,加入瓊脂孔內(nèi)。同時在另一孔內(nèi)加滿標(biāo)準(zhǔn)溶菌酶作為陽性對照。
7.置25~30℃ 18~24h,觀察結(jié)果。
8.在每批測定同時,將各種濃度的溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)液加于小孔中,同法測定溶菌環(huán)直徑,用半對數(shù)紙,以溶菌酶濃度為縱坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),溶菌環(huán)直徑為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。從曲線上查出每毫升待檢品所含溶菌酶的微克數(shù)。
積液溶菌酶注意事項
檢查前:受試者停止服用藥物并盡量減少運動以便保證檢測的質(zhì)量
檢查時:放松身體,謹(jǐn)聽醫(yī)師的操作
不適宜人群:沒有。